L-typ napäťovo závislých vápnikových kanálov v diferencovaných PC12 bunkách

Dobrý den, gratulujem k zaujimavej a hodnotnej práci. CHcel by som sa opytat, ci by tieto kanaly mohli byt potencialnym zdrojom terapie nadorov nadobliciek? Daujem

Dakujem velmi pekne, som velmi rada ze sa Vam praca pacila. Napäťovo závislé vápnikové kanály sú exprimované takmer vo všetkých excitabilných bunkách a vápnik, ktorý prepúšťajú cez plazmat...Show all commentsickú membránu by mal byť v obličkách podľa potrieb organizmu bud vstrebávaný alebo vylučovaný, a to produkciou parathormónu, kalcitonínu, alebo kalcitriolu. Hormóny vylúčené obličkami vytvárajú aktívnu formu vitamínu D, ktorá podporuje vstrebávanie vápnika z potravy. Pri patofyziologických podmienkach alebo pri nedostatočnom vstrebávaní vápnika, by podľa môjho názoru, mohli pomocť blokátory vápnikových kanálov, ktoré potláčajú vstup vápnika do vnútra buniek. Nie sú však natoľko špecifické, aby sa dali použiť na tento konkrétny typ a zrejme by blokovali aj vstup vápnika cez zdravé bunky, čo by však viedlo k zlyhaniu srdca, svalovým kŕčom a poruche CNS.

Vážená Mgr. Lichvárová.
Gratulujem k výbornej práci a aktuálnej problematike. Chcela by som sa opýtať, kde sa dajú uplatniť poznatky o signálnych dráhach počas neurodiferenciácie PC12 b...Show all commentsuniek ?

Ďakujem veľmi pekne, teší ma záujem o moju problematiku. Signálne dráhy predstavujú súbor zložitých kaskádovitých reakcií, ktoré sú sprostredkované vzájomnou previazanosťou sieťou kináz,...Show all comments fosfatáz, transkripčných faktorov, G proteínov a rôznych enzýmov. Pri prenose signálu do jadra dochádza k aktivácii transkripčných faktorov, ktoré regulujú expresiu určitých génov. Následná syntéza proteínu so špecifickou funkciou umožňuje proliferáciu alebo diferenciáciu buniek, spustenie či zablokovanie bunkového cyklu. Zamerať sa môžeme na ktorýkoľvek "medzikrok" z danej kaskády a sledovať jeho funkciu, čo je pre nás ako vedcov, veľmi zaujímavé. V našej práci sme sledovali napäťovo závislé vápnikové kanály, ktoré umožňujú vstup vápnika do vnútra buniek a vápnik v bunke pôsobí ako druhý posol, ktorý sa zúčastňuje prenosu signálu v množstve signálnych dráh. Zároveň sú tieto ióny vápnika nevuhnutné v procese diferenciácie buniek, no dráha ich vstupu z extracelulárneho prostredia do intracelulárneho prostredia zatiaľ nebola jasne popísaná.

Prečo ste sa rozhodli používať isradipín a nimodipín ?

Isradipín a nimodipín patria medzi dihydropyridínové blokátory L-typu vápnikových kanálov a inhibícia dihydropyridínmi je natoľko typická, že v staršej literatúre bol L-typ vápnikových kanál...Show all commentslov označovaný ako dihydropyridínové receptory.

V abstrakte uvádzate, že podávanie isradipínu nemalo signifikantný vplyv na NGF aktivovaný rast neuritov. A podávanie nimodipínu malo vplyv na tento rast?

V našej práci sme sledovali účinky oboch blokátorov, ktoré mali rovnaký účinok na zablokovanie L-typu vápnikového kanála. Nimodipín však zablokoval vápnikový kanál pri vyššej koncetnrácii...Show all comments (10 μM) v porovaní s isradipínom, ktorý rovnaký účinok sprostredkoval už pri koncentrácii 1 μM. Preto sme sa rozhodli dalej používať nižšiu koncentráciu blokátora, ktorá je však rovnako účinná.

Pekna praca. Chcela by som sa spytat aky vyznam ma podla teba zvyseny vstup vapnika do buniek pod vplyvom NGF, ked nijako vyrazne neovplvnuje ich rozrastanie.

Ahoj Veronika, som veľmi rada že sa ti práca páčila. V našej práci sme potvrdili, že NGF umožňuje diferenciáciu buniek. V našich experimentoch sme zistili, že táto diferenciácia sa prejavila s...Show all commentsigmoidálnym nárastom veľkosti buniek, merali sme ju ako bunkovú kapacitu. S postupnou kultiváciou PC12 buniek s NGF sme pozorovali aj nárast neuritových výbežkov a vyššie percento diferencovaných buniek. Diferenciácia buniek pod vplyvom NGF je sprostredkovaná prostredníctvom receptora tyrozín kinázy A a vedie ku kaskáde intracelulárnych procesov, ktoré umožňujú expresiu rozličných génov, kódujúcich enzýmy, ionové kanály a ostatné intracelulárne komponenty. Vstup vápnika do bunky nie je riadený len jedným signálom, ale ide o kombináciu viacerých signálov a okrem L-typu vápnikových kanálov môže do bunky vstupovať aj inou cestou. Jeho úloha je však v bunkách nepostrádateľná, či už pre špecifickú signálnu transdukciu, aktiváciu kináz, presynaptické uvoľňovanie neurotransmiterov, postsynaptickú excitabilitu a indukciu génovej expresie.

Ahoj Veronika, som veľmi rada že sa ti práca páčila. V našej práci sme potvrdili, že NGF umožňuje diferenciáciu buniek. V našich experimentoch sme zistili, že táto diferenciácia sa prejavila s...Show all commentsigmoidálnym nárastom veľkosti buniek, merali sme ju ako bunkovú kapacitu. S postupnou kultiváciou PC12 buniek s NGF sme pozorovali aj nárast neuritových výbežkov a vyššie percento diferencovaných buniek. Diferenciácia buniek pod vplyvom NGF je sprostredkovaná prostredníctvom receptora tyrozín kinázy A a vedie ku kaskáde intracelulárnych procesov, ktoré umožňujú expresiu rozličných génov, kódujúcich enzýmy, ionové kanály a ostatné intracelulárne komponenty. Vstup vápnika do bunky nie je riadený len jedným signálom, ale ide o kombináciu viacerých signálov a okrem L-typu vápnikových kanálov môže do bunky vstupovať aj inou cestou. Jeho úloha je však v bunkách nepostrádateľná, či už pre špecifickú signálnu transdukciu, aktiváciu kináz, presynaptické uvoľňovanie neurotransmiterov, postsynaptickú excitabilitu a indukciu génovej expresie.

Lucka, prepac, ze ta tu attackujem otazkami, ale mas nejake vedomosti o funkcnom prepojeni CaV1.2 kanálu a Na,K-ATPazy??? Ovplyvnuju hladiny vapnika aj ine transportne systemy v bunke, napr. uz spominanu Na...Show all comments+,K+-ATPázu ? Dakujem :)

Ahoj Barborka, pokúsim sa odpovedať na tvoju otázku čo najzrozumiteľnejšie, aj ked vápniková signalizácia je tak zložitá, že si nie som istá, či sa mi to podarí. Aktivita napäťovo závislýc...Show all commentsh vápnikových kanálov je spojená so zvýšeným vstupom vápnika do bunky a má teda za následok zvýšenie jeho vnútrobunkovej koncentrácie. Ióny vápnika zastávajú významnú úlohu v signalizačných dráhach, kde vystupujú ako sekundárny messenger a regulujú expresiu génov. Aktivita napäťovo závislých vápnikových kanálov je prostredníctvom intracelulárnych regulačných dráh previazaná s aktivitou viacerých transportérov, ako napríklad ryanodínový kanál a IP3 receptor, alebo s rôznymi ATPázami v povrchovej membráne bunky ako sú Na/Ca výmenník alebo Na/K ATPáza. Ovplyvnenie kanálov môže byť priame, ako napríklad pri fyzickej väzbe medzi CaV1.3 kanálom a ryanodínovým receptorom typu 2, u ktorých je známe previazanie v signalizačnej dráhe, alebo nepriame, kedy vtok Ca2+ iónov cez L-typ vápnikových kanálov aktivuje uvoľnenie vápnika z vnútrobunkových zásobníkov cez IP3 receptory. Vtok vápnika cez L-typ napäťovo závislých vápnikových kanálov reguluje aj expresiu určitých génov, čím môže ovplyvňovať aktivitu proteínov, ktorými sú kódované. V neurónoch dochádza k zmene koncentrácie vápnika pri odpovedi na elektrický alebo chemický signál, čo umožňuje správnu funkciu neurónov, ich excitabilitu, synaptický prenos a uvoľňovanie neurotransmiterov. Bolo dokázané, že asociácia L-typu vápnikových kanálov, konkrétne CaV1.2 kanála so signálnymi proteínmi je potrebná pre špecifickú signálnu transdukciu. V tomto procese zrejme zohráva úlohu aj Na /K ATP-áza, ktorá pomáha udržiavať pokojový membránový potenciál a funguje ako signálny transducer, ktorý reguluje MAPK signálnu dráhu, ROS, alebo hladinu vnútrobunkového vápnika.

Ďakujem Lucka za VYCERPAVAJUCU odpoved, hned mam v tom jasnejsie a mozem kludne spavat :) bodaj by vsetci mladi vedecki pracovnici boli tak svedomite pripraveni na pohotove odpovede ako si TY :) Este raz sa...Show all comments klaniam tvojim vedomostiam a dakujem za odpoved !!! Som pozitivne ohurena !!! BRAVO ;)