jazyk / language:
Interactive Conference
of Young Scientists
Back to section

Vplyv oxytocínu na zmeny génovej expresie hipokampálnych neurálnych buniek


Go to the discussion

Vplyv oxytocínu na zmeny génovej expresie hipokampálnych neurálnych buniek

Stanislava Bukatová 1 Ján Bakoš 1 Alexandra Reichová 1 Zuzana Bačová 1

1Ústav experimentálnej endokrinológie,Biomedicínske centrum SAV, Bratislava, Slovensko
stanislava.bukatova@savba.sk

Hipokampálna neurogenéza v dospelosti púta pozornosť najmä v dôsledku jeho vplyvu na mozgovú plasticitu a vyššie kognitívne funkcie. Hipokampus je štruktúra mozgu najviac citlivá na pôsobenie neuropeptidu oxytocínu (OXT). OXT podporuje bunkovú proliferáciu a neurogenézu v hipokampe hlodavcov, pričom narušená oxytocínová signalizácia je spojená s patogenézou viacerých neurovyvínových ochorení, ako napr. porucha autistického spektra.
Cieľom práce bolo zhodnotiť vplyv oxytocínu na diferenciáciu neuronálnych buniek v hipokampe (in vitro). Určiť zmeny zastúpenia jednotlivých typov buniek u zvierat, ktorým bol podávaný OXT. Stanoviť špecifické markery jednotlivých podtypov neuronálnych buniek na génovej úrovni.

Primárne hipokampálne bunky z neonatálnych C75BL myší (n=7) boli inkubované s oxytocínom (1 μM) v priebehu 1 až 8 dní. Neuróny boli značené špecifickou protilátkou proti MAP2 (s mikrotubulmi asociovaný proteín 2) a pomocou programu ImageJ sa určilo ich zastúpenie oproti ostatným (neznačeným) bunkám. Dospelým C75BL myšiam (n=5/skupina), sa po dobu 5 dní aplikoval OXT (1mg/ml/kg, i.p.) alebo fyziologický roztok. Hipokampus bol odobratý na 6.deň. Neonatálnym C75BL myšiam (n=6/skupina), sa na 2. a 3. postnatálny deň aplikoval oxytocín (2μg/mláďa, s.c.) alebo fyziologický roztok. K odobratiu hipokampov došlo na 5.postnatálny deň. Použitím qPCR bola stanovená génová expresia gliálnych a neuronálnych markerov.

Zastúpenie MAP2 značených neurónov bolo signifikantne vyššie po 8. dňovej inkubácii s  OXT oproti kontrolnej skupine izolovaných hipokampálnych buniek. U dospelých myší sme zaznamenali signifikantný pokles mRNA markeru exprimovaného v neurálnych progenitorových bunkách SOX2. V prípade neonatálnych myší došlo k jeho signifikantnému zvýšeniu. Génová expresia markerov pre astrocyty (GFAP) aj oligodendrocyty (CNPase) poklesla u dospelých aj neonatálnych jedincov, expresia markeru neurónov NSE sa zmenila iba u dospelých myší. V prípade neonatálnych jedincov výrazné zmeny génovej expresie markerov pre jednotlivé subtypy neurónov neboli detekované. Signifikantná zmena sa udiala iba v prípade markeru pre serotonergne (SerT) a gabaergne neuróny (GAD1/GAD2). Zmena génovej expresie markerov pre glutamatergne (VGlut), dopaminergne (TH) a cholinergne (ChAT) neuróny nenastala. Podanie OXT dospelým myšiam zmenilo génovú expresiu viacerých špecifických markerov. U dospelých jedincov sme zaznamenali pokles expresie markeru SerT a ChAT. Zvýšenie expresiu markerov GAD1/2 sa udialo na úkor signifikantného zníženia génovej expresie markeru ChAT. Naše výsledky poukazujú na oxytocínom indukovanú zmenu génovej expresie u neonatálnych aj dospelých myší. Na presnú špecifikáciu, prečo v prípade niektorých markerov došlo k zvýšeniu resp. zníženiu a či sa tieto zmeny prejavia aj na proteínovej úrovni sú potrebné ďalšie, doplňujúce štúdie.

Práca bola podporená Agentúrou na podporu výskumu a vývoja APVV-15-0205, VEGA 2/0016/16 a 2/0038/18.

 
It appears that your web browser does not support PDF documents viewing

Discussion

Lucia Hoppanová 13.05.2019 15:22
Dobrý deň , píšete v práci, že sa po oxytocíne zvýšil počet MAP2 značených neurónov oproti kontrolnej skupine. Zmenil sa aj celkovo počet buniek (MAP2 neznačených)?
Re: Lucia Hoppanová 30.05.2019 09:33
Dobrý deň, prepáčte za neskorú reakciu, v tomto prípade skôr išlo o účinok na prežívanie buniek. V prípade vplyvu oxytocínu sme zistili, že neuróny mali lepšiu schopnosť prežiť v porovnan...Show all comments
Re: Re: Lucia Hoppanová 30.05.2019 09:43
Ďakujem za odpoveď
Peter Bališ
Moderator
otázka 30.05.2019 09:20
Dobrý deň, zaujímalo by ma či ste sledovali v rámci experimentu, nie len prezentujúcej práce, oxidačné markery. Ak áno aké a s akým výsledkom?

Ďakujem
Re: otázka 30.05.2019 09:38
Dobrý deň, v našej práci sme sa nezaoberali oxidačnými markermi.
Partners
General partner

Partners
Special thanks
Media partners
Inzercia zadarmo
Organizer