jazyk / language:
Interactive Conference
of Young Scientists
Back to section

Produkcia katalázy-peroxidázy AfKatG z archeóna Archaeoglobus fulgidus v Escherichia coli

Discussion interaction
Overall design
Scientific work
Hide evaluation

Go to the discussion

Produkcia katalázy-peroxidázy AfKatG z archeóna Archaeoglobus fulgidus v Escherichia coli

Simona Rezáková 1 Eva Struhárňanská 1 Zdeno Levarski 2 Stanislava Bírová 1 Martin Šafránek 1 Stanislav Stuchlík 1 Ján Turňa 1

1Katedra molekulárnej biológie, Prírodovedecká fakulta, Univerzita Komenského v Bratislave, Bratislava 4, Slovenská republika
2Univerzita Komenského, Vedecký park, Ilkovičova 8, 84215 Bratislava 4, Slovenská republika
simoniela.rezakova@gmail.com

Katalázy-peroxidázy sú enzýmy zodpovedné za degradáciu reaktívnych foriem kyslíka v živých organizmoch. Degradáciou peroxidu vodíka vzniká kyslík a voda, čo má pozitívny vplyv na životné prostredie [1]. Tieto bifunkčné enzýmy existujú vo forme homodimérov alebo homotetramérov s podjednotkami o veľkosti približne 80 kDa [2]. AfKatG je kataláza-peroxidáza pochádzajúca z hypertermofilného sulfát-redukujúceho archeóna Archaeoglobus fulgidus. Jej teplotné optimum je 70 °C pre katalázovú a 80 °C pre peroxidázovú aktivitu [3]. Bunky Escherichia coli kmeňa XL1-Blue nesúce gén pre AfKatG boli pri 37 °C schopné produkovať enzým v solubilnej forme. Optimalizovali sme zloženie média pre batch-fermentácie, ako najvhodnejšie sme zvolili TB médium. Produkovaný enzým sme purifikovali afinitnou chromatografiou, dialyzovali ho oproti vode a stanovili sme jeho špecifickú enzýmovú aktivitu. 

Príspevok je výsledkom realizácie projektov „Syntetická biológia a produkcia peroxidáz de novo“ (APVV-14-0375) a „Univerzitný vedecký park Univerzity Komenského v Bratislave“ (ITMS 26240220086) na základe podpory operačného programu Výskum a vývoj financovaného z ERDF.
[1] Vlasits J., Jakopitsch C., Bernroitner M., et al. (2010) Arch. Biochem. Bioph. 500, p. 74.
[2] Singh R., Wiseman B., Deemagarn T., et al. (2008). Arch. Biochem. Bioph. 471, p.  207.
[3] Kengen S. W. M., Bikker F. J., Hagen W. R., et al. (2001) Extremophiles. 5, p. 323.
It appears that your web browser does not support PDF documents viewing

Discussion

Comment first
Partners
General partner

Partners
Special thanks
Media partners
Inzercia zadarmo
Organizer