Príjem externých sterolov z prostredia je jednou z foriem rezistencie kvasiniek voči antimykotikám, ktoré blokujú syntézu ergosterolu. V kvasinke Saccharomyces cerevisiae sú za import sterolov zodpovedné dva ABC transportéry lokalizované v plazmatickej membráne, Aus1p a Pdr11p. Ich delécia úplne zastaví príjem sterolov z média1, čoho dôsledkom je letálny fenotyp v prípade, že bunky nie sú schopné syntézy ergosterolu, napríklad v anaerobióze. Expresia sterolových importérov, Aus1p a Pdr11p, je v anaeróbnych podmienkach regulovaná minimálne troma transkripčnými faktormi: Upc2p, Ecm22p a Sut1p1, 2.
Naša práca je zameraná na expresiu génov kódujúcich tieto transportéry a ich transkripčné regulátory v anaeróbnych podmienkach. Zistili sme, že rast v anaeróbnom médiu suplementovanom cholesterolom spôsobuje mnohonásobné zvýšenie expresie AUS1 a PDR11, v porovnaní s rastom na ergosterole. Zaujímavé je, že suplementácia len 5-percentným ergosterolom v zmesi s cholesterolom znižuje expresiu AUS1 až o 50%. Upc2p a Ecm22p sú vo všeobecnisti považované za aktivátory biosyntetickej dráhy ergosterolu. Avšak naše pozorovania ukazujú, že expresia ECM22 má opačný trend ako UPC2.
Passive
skusali ste aj dlhsiu kultivaciu S.cerevisiae v 5% ergosterole? Pretoze by ma zaujimalo, ci by sa kvasinky po prvotnom "šoku" pri zmene kultivacneho media vedeli adaptovat ...Show all comments
Passive
dosiaľ sme pri kultivácii na 5% ergosterole merali mieru rastu a expresie len po 6 a 24 hodinách, čím sme sledovali rozdiel medzi exponenciálnou a stacionárnou fázou rastu. ...Show all comments
Passive
Passive