jazyk / language:
INTERAKTÍVNA KONFERENCIA
MLADÝCH VEDCOV
Späť do sekcie

Príprava integrantov Pichie pastoris schopných exprimovať ľudský rastový hormón

Diskusná interakcia
Celkové prevedenie (dizajn)
Vedecká práca
Zobraziť všetky hodnotenia

Prejsť do diskusie

Príprava integrantov Pichie pastoris schopných exprimovať ľudský rastový hormón

Simona Rezáková 1 Diana Hopková 1 Kristína Jiríčková 1 Stanislav Stuchlík 1 Ján Krahulec 1 Ján Turňa 1 Zdenko Levarski 1

1Univerzita Komenského v Bratislave, Prírodovedecká fakulta, Katedra molekulárnej biológie, Mlynská dolina B-2, 842 15 Bratislava, Slovenská republika
simoniela.rezakova@gmail.com

Ľudský rastový hormón (hGH) je polypeptid pozostávajúci zo 191 aminokyselín, ktorý je syntetizovaný, skladovaný a sekretovaný somatotropnými bunkami adenohypofýzy [1]. V súčasnosti sa používa na liečbu mnohých ochorení. V tejto štúdii bola pre produkciu hGH zvolená kvasinka Pichia pastoris, ktorá je schopná rásť do vysokých optických hustôt [2] a vďaka jej silnému promótoru dokáže produkovať rekombinantné proteíny vo veľkých množstvách. Prvým krokom pri produkcii kmeňa bola integrácia zvoleného génu do hostiteľského organizmu pomocou elektroporácie. Integrácia sa potvrdila PCR reakciou a expresiou v baničkách. Výsledky SDS-PAGE sa overili Dot blot analýzou. Z 50 klonov divého typu P. pastoris až 43 integrantov obsahovalo gén pre hGH. Z nich 2 integranty boli schopné exprimovať hGH v detekovateľnej miere.

Príspevok je výsledkom realizácie projektu: “Príprava biologicky aktívnych látok na báze rekombinantných proteínov (BIOREKPROT, ITMS 26240220048)“ na základe podpory operačného programu Výskum a vývoj financovaného z Európskeho fondu regionálneho rozvoja.
[1] Herman-Bonert, V. S., Melmed, S. (2011). "The pituitary (Third edition)." 83-117.
[2] Cereghino, J. L., Cregg, J. M. (2000) FEMS Microbiol Rev 24, p. 45.
Zdá sa, že Váš internetový prehliadač nepodporuje prehliadanie PDF dokumentov.
Pre zobrazenie súboru je potrebné maš nainštalovaný Adobe Reader.

Diskusia

Martin Benej
Pasívny
Otazka 28.05.2014 08:02
Dobry den prajem, velmi zaujimava tema, chcel by som sa opytat, ci planujete Vase vysledky ponuknut komercnej sfere na rutinnu pripravu rastoveho hormonu? Dakujem.
Re: Otazka 28.05.2014 12:34
Dobry den, tesi ma Vas zaujem. Zatial sme nad komercnou produkciou ani neuvazovali, nakolko protein musime najskor purifikovat do velmi vysokej cistoty, comu sa budeme venovat v blizkej buducnosti.
Naši partneri
Generálny partner

Partneri
Špeciálne poďakovanie
Mediálni partneri
Inzercia zadarmo
Usporiadateľ