Testovanie citlivosti primárnej bunkovej línie DFSC na statíny
Janka Pálešová 1 Romana Záhumenská 1 Terézia Okajčeková 1 Marián Kasaj 2 Ján Strnádel 3 Dagmar Statelová 2 Henrieta Škovierová 3 Erika Halašová 3,4
2Klinika stomatológie a maxilofaciálnej chirurgie UNM
3Martinské centrum pre biomedicínu, Univerzita Komenského v Bratislave, Jesseniova lekárska fakulta v Martine
4Ústav lekárskej biológie, Univerzita Komenského v Bratislave, Jesseniova lekárska fakulta v Martine
Dospelé zubné kmeňové bunky majú výbornú schopnosť proliferácie a diferenciácie do iných typov tkanív v rámci svojej zárodočnej vrstvy. V súčasnosti si úspešná terapia kmeňovými bunkami vyžaduje regulovanú proliferáciu a diferenciáciu kmeňových buniek. Jedným z týchto regulátorov sú aj statíny. Tieto liečivá znižujú hladinu cholesterolu v krvi a to inhibíciou kľúčového enzýmu v biosyntéze cholesterolu, 3-hydroxy-3-metylglutaryl koenzým A reduktázy. Statíny sa využívajú pri liečbe kardiovaskulárnych ochorení pretože negatívne ovplyvňujú syntézu cholesterolu. Zároveň sa potvrdil ich pleitropný účinok na proliferáciu ako aj diferenciáciu. Pri aplikácii v nízkych koncentráciách sú statíny schopné zlepšiť prežívanie kmeňových buniek.
V našej práci sme použili de novo pripravenú primárnu bunkovú líniu z tkaniva dentálneho folikulu. Bunky sme charakterizovali na základe expresie špecifických CD markerov typických pre mezenchymálne kmeňové bunky. Potvrdili sme ich diferenciačný potenciál na chodrocyty, adipocyty a osteoblasty. Následne sme testovali časovú a koncentračnú závislosť vplyvu simvastatínu na zubné kmeňové bunky spektrofotometricky pomocou testu cytotoxicity - MTT testom a prietokovou cytometriou – anexínová esej. Stanovili sme IC 50 pre simvastatín. Takouto koncentráciu sme ovplyvnili zubné kmeňové bunky a analyzovali sme expresiu špecifických génov.
Potvrdili sme že simvastatín v nižších koncentráciách zvyšuje proliferáciu DFSC a vo vyšších koncentráciách indukuje apoptózu DFSC.