jazyk / language:
INTERAKTÍVNA KONFERENCIA
MLADÝCH VEDCOV
Späť do sekcie

Výber a optimalizácia najvhodnejších metód na extrakciu proteínových frakcií zrna pšenice (Triticum aestivum)


Prejsť do diskusie

Výber a optimalizácia najvhodnejších metód na extrakciu proteínových frakcií zrna pšenice (Triticum aestivum)

Soňa Fekecsová 1 Martin Hajduch 1

1Ústav genetiky a biotechnológií rastlín SAV, Nitra, Slovenská republika
FekecsovaSona@azet.sk

Pšenica (Triticum aestivum L.) je tradičná, základná komodita zohrávajúca významnú úlohu v slovenskom i svetovom poľnohospodárstve. Patrí medzi hospodársky najvýznamnejšie plodiny, kde okrem tradičného spracovania pre ľudskú spotrebu sa pestuje aj pre kŕmne účely a uplatnenie našla aj v rôznych odvetviach priemyslu. Pšenica a obilniny všeobecne predstavujú dôležitý zdroj bielkovín vo výžive ľudí, kde pokrývajú takmer polovicu potreby bielkovín a energie. Pšeničné bielkoviny majú nutričný i technologický význam, kde významnú úlohu zastávajú zásobné frakcie endospermu zrna. Zo zdravotného hľadiska zásobné proteíny sú najviac spájané s potravinovými intoleranciami a rôznymi typmi alergií. Bielkoviny zrna majú ako jediné z cereálií schopnosť vytvárať zložité komplexy bielkovín, škrobu, minerálnych látok, lipidov a spolu s vodou vytvárajú lepok [1]. Z dôvodu vysokej špecificity pšeničných bielkovín je najdôležitejšie získať frakcie s čo najväčšou čistotou a optimálnym množstvom vzorky.

Cieľom práce je  optimalizácia najlepšej extrakčnej metódy ako významný krok proteomických analýz. Pšeničné bielkoviny sú na základe Osbornovej klasifikácie zatriedené do 4 skupín podľa rozdielnej rozpustnosti na albumíny, globulíny, gliadíny a gluteníny [2]. V našej práci sme sa zamerali na frakcie albumínov ako najčastejšieho „spúšťača“ pekárskej astmy a frakcie gliadínov asociovaných s celiakiou. Proteínové frakcie boli extrahované z mechanicky homogenizovaných zrelých semien pšenice letnej formy ozimnej (Triticum aestivum L.) 4 rôznych odrôd. Z dvoch slovenských odrôd Košútka, Viginta, českej odrody Bardotka a holandskej odrody Ilias. Po sérii extrakčných metód najlepšie výsledky z hľadiska čistoty a množstva vzorky pre frakciu albumínov sme získali použitím 25 mM roztoku fosforečnanu sodného pH 7.5 pri 4°C. Pre frakciu zásobných gliadínov sa najvhodnejšou extrakčnou metódou  ukázalo použitie 50% propanolu, kde vzorky boli mixované pri 21°C. Takto pripravené frakcie s najlepšou čistotou a optimálnym charakterom bielkovín ďalej poslúžia ako súčasť série metodík proteomických analýz s cieľom medziodrodového porovnávania obsahu alergénnych proteínov v pšeničnom zrne.

[1] Tatham, A.S., Shewry, P.R. Clinical and Experimental Allergy. 2008, 1712–1726.
[2] Osborne, T.B. Longmans Green & Co, 1924, 154.
Zdá sa, že Váš internetový prehliadač nepodporuje prehliadanie PDF dokumentov.
Pre zobrazenie súboru je potrebné maš nainštalovaný Adobe Reader.

Diskusia

Diskusia je zatiaľ prázdna, buďte prvý komentujúci
Naši partneri
Generálny partner

Partneri
Špeciálne poďakovanie
Mediálni partneri
Inzercia zadarmo
Usporiadateľ