jazyk / language:
INTERAKTÍVNA KONFERENCIA
MLADÝCH VEDCOV
Späť do sekcie

Kinetika DNA opravných fokusov indukovaných ionizujúcim žiarením v lymfocytoch pacientiek s rakovinou prsníka

Diskusná interakcia
Celkové prevedenie (dizajn)
Vedecká práca
Schovať hodnotenia

Prejsť do diskusie

Kinetika DNA opravných fokusov indukovaných ionizujúcim žiarením v lymfocytoch pacientiek s rakovinou prsníka

Katarína Vigašová 1 Matúš Durdík 1 Gabriel Králik 2 Eva Marková 1

1Oddelenie rádiobiológie, Ústav experimentálnej onkológie, Slovenská akadémia vied, Bratislava,
2Ústav klinickej fyziky, Onkologický ústav sv. Alžbety
katkalauravigasova@gmail.com

Ionizujúce žiarenie využívané v rádioterapii nádorov prsníka indukuje v cieľovom nádorovom tkanive poškodenia DNA, tzv. dvojvláknové zlomy (DSB), ktoré sú pre bunky letálne. Pri liečbe však nie je zasiahnutý len nádor, ale aj zdravé okolité tkanivá a lymfocyty, ktoré ním prechádzajú ako súčasť krvného obehu a DSB sú indukované aj v nich. Každá bunka má vyvinutý mechanizmus, ktorý zabezpečuje opravu DSB a obnovu integrity DNA. Na tomto procese sa zúčastňuje množstvo proteínov, ktoré sa zhromažďujú okolo DSB a vytvárajú opravné centrá. Imunologickým značením opravných proteínov môžeme stanoviť počet DNA opravných fokusov, sledovať kinetiku opravy DNA a kvantifikovať fokusy, ktoré ostávajú neopravené, tzv. reziduálne fokusy. Lymfocyty použité v experimente boli izolované z periférnej krvi pacientiek s rakovinou prsníka pred začiatkom rádioterapie a jeden rok po jej ukončení. Časť získaných vzoriek bola zamrazená, časť bola použitá ako čerstvá krv. Lymfocyty boli následne ožiarené in vitro ionizujúcim žiarením dávkou 2 Gy a fixované na mikroskopické sklá v rôznych časových úsekoch: 30 minút, 1 hodina, 2 hodiny a 24 hodín po ožiarení. DNA opravné fokusy boli označené pomocou protilátok proti opravným proteínom γH2AX a 53BP1 a DNA bola vizualizovaná farbičkou DAPI. Analytický systém Metafer založený na fluorescencii umožnil vizualizáciu DNA opravných fokusov a ich následnú kvantifikáciu pomocou softvéru MetaCyte ako priemerný počet fokusov na jednu bunku. Ionizujúce žiarenie indukovalo v obidvoch pozorovaných skupinách významné množstvo DNA opravných fokusov, avšak v bunkách, ktoré boli odobraté pred začiatkom rádioterapie pacientiek, bol pozorovaný signifikantne vyšší počet fokusov v porovnaní s lymfocytmi odobratými jeden rok po ukončení terapie. Množstvo fokusov postupne s časom klesalo v oboch odberoch rovnako, až po 24 hodinách kleslo takmer na úroveň neovplyvnených buniek. Vplyv zamrazenia lymfocytov v tekutom dusíku na počet DNA opravných fokusov sa nepotvrdil. Tieto výsledky naznačujú, že rádioterapia vplýva na tvorbu DNA opravných fokusov spôsobenú in vitro ionizujúcim žiarením, a umožňujú lepšie porozumieť neskorým efektom rádioterapie u pacientiek s rakovinou prsníka.

Zdá sa, že Váš internetový prehliadač nepodporuje prehliadanie PDF dokumentov.
Pre zobrazenie súboru je potrebné maš nainštalovaný Adobe Reader.

Diskusia

Diskusia je zatiaľ prázdna, buďte prvý komentujúci
Naši partneri
Generálny partner

Partneri
Špeciálne poďakovanie
Mediálni partneri
Inzercia zadarmo
Usporiadateľ