jazyk / language:
INTERAKTÍVNA KONFERENCIA
MLADÝCH VEDCOV
Späť do sekcie

Vývoj elektrochemických biosenzorov na báze redoxne značených aptamérov na diagnostiku onkologických ochorení


Prejsť do diskusie

Vývoj elektrochemických biosenzorov na báze redoxne značených aptamérov na diagnostiku onkologických ochorení

Cyril Slabý 1 Lenka Bábelová 2 T. Hianik 1

1Katedra Jadrovej Fyziky a Biofyziky, Fakulta Matematiky, Fyziky a Informatiky, Univerzita Komenského, Bratislava, Slovensko
2Ústav biochémie a genetiky živočíchov, Centrum biovied SAV, Bratislava, Slovensko
slaby.cyril@gmail.com

Úmrtnosť na niektoré závažné kardiovaskulárne a infekčné ochorenia sa v posledných desaťročiach významne znížila. Podobne je to aj s onkologickými ochoreniami. Avšak určité typy karcinómov naďalej nie je možné úspešne liečiť, najmä ak sú diagnostikované príliš neskoro [1]. Najčastejším onkologickým ochorením u detí je akútna lymfoblastická leukémia (ALL). V čase, kedy je ALL diagnostikovaná štandardnými metódami, býva už takmer celá populácia zdravých lymfocytov nahradená leukemickým typom. K súčasne využívaným metódam diagnostiky ALL patrí vyšetrenie krvného obrazu a mikroskopického leukogramu. Diagnózu potvrdzuje biopsia kostnej drene [2].

Veľký potenciál pre zdokonalenie diagnostických metód onkologických ochorení, vrátane ALL, má vývoj biosenzorov. Biosenzory sú analytické zariadenia, ktorých detekčnú časť, receptor, tvorí biologický prvok. V dnešnej dobe asi najčastejšie študovanými typmi bioreceptorov sú aptaméry. Aptaméry sú jednovláknové DNA alebo RNA oligonukleotidy. Unikátnou vlastnosťou aptamérov je zmena ich 3D konformácie v prítomnosti špecifického typu molekúl a tvorba väzbového miesta pre tieto molekuly. Biosenzory, ktoré ako receptory využívajú aptaméry, nazývame aptasenzory [3].

V práci sme sa venovali optimalizácii aptasenzorov na detekciu T-lymfoblastov akútnej lymblastickej leukémie. Ako detekčný prvok slúžil aptamér sgc8c, ktorý je špecifický pre proteín tyrozín kinázu 7 v membráne T-lymfoblastov. Testovali sme dva rôzne elektrochemicky modifikované aptaméry. Prvý, k tvorbe signálu, využíval ferocén-karboxylovú kyselinu, ktorú sme v procese imobilizácie naväzovali na aptamér. Druhý využíval metylénovú modrú, ktorá bola kovalentne pripojená k  aptaméru. Získané výsledky z detekcie T-lymfoblastov prostredníctvom diferenciálnej pulznej voltamerie potvrdzujú schopnosť aptasenzorov detegovať leukemické bunky v širokom rozsahu koncentrácií (50 – 5 000 buniek/ml) s limitom detekcie 4851 buniek/ml a 7841 buniek/ml.

Táto práca bola podporená vedeckou grantovou agentúrou VEGA, číslo projektu: 1/0419/20.
[1]    R. McPherson, M. Pincus, Henry’s clinical diagnosis and management by laboratory methods. 2017 by Elsevier Inc.  1433-1442.
[2]    A.Kolenova, E. Kaiserova, Pediatr. prax, 2012, 13(4): 161 - 165.
[3]    T. Hianik, J. Wang,  Electroanalysis 2009, 21, No. 11, 1223 - 1235.
Zdá sa, že Váš internetový prehliadač nepodporuje prehliadanie PDF dokumentov.
Pre zobrazenie súboru je potrebné maš nainštalovaný Adobe Reader.

Diskusia

Špecificita aptasenzorov 14.05.2020 09:01
Dobrý deň Cyril,
veľmi pekná práca, jasne zdôvodnený zámer, metodický postup, aj prezentácia aj interpretácia výsledkov, aj záver o citlivosti testovaných aptasenzorov. Vzhľadom na aktuá...
Zobraziť celý komentár
Cyril Slabý
Pasívny
Re: Špecificita aptasenzorov 23.05.2020 20:26
Dobrý deň. Ďakujem za otázky. Aptasenzory sme testovali aj v prítomnosti kontrolných buniek U266. Tieto PTK7-negatívne B-lymfocyty s aptasenzorom neinteragovali. Zatiaľ sme mali k dispozícii iba ten...Zobraziť celý komentár
Špecificita aptasenzorov 14.05.2020 09:02
Ešte dodatočná otázka k zistenému detekčnému limitu. V abstrakte uvádzate, že "V čase, kedy je ALL diagnostikovaná štandardnými metódami, býva už takmer celá populácia zdravých lymfoc...Zobraziť celý komentár
Cyril Slabý
Pasívny
Re: Špecificita aptasenzorov 23.05.2020 20:28
Koncentrácia lymfocytov v periférnej krvi je približne 1000000 buniek/ml. Citlivá diagnostická metóda by mala byť schopná detegovať jednu leukemickú bunku na 10000 zdravých buniek. Naša metóda z...Zobraziť celý komentár
Re: Re: Špecificita aptasenzorov 23.05.2020 22:04
Ďakujem za odpoveď a želám veľa úspechov a možností pokračovať vo výskume.
iwa
Naši partneri
Generálny partner

Partneri
Špeciálne poďakovanie
Mediálni partneri
Inzercia zadarmo
Usporiadateľ