Baktérie zaraďované do rodu Rhodococcus sú aeróbne, nepohyblivé, grampozitívne aktinomycéty tvoriace koky a tyčinky [1]. Rod pozostáva z geneticky a fyziologicky rôznorodých baktérií, ktoré boli izolované z rôznych biotopov a lokalít kontaminovaných aromatickými polutantmi. Vysoká frekvencia rekombinácií u niektorých kmeňoch prispieva k flexibilite genómu a schopnosti ľahko získať nové gény a následne nové enzymatické vlastnosti. Na základe veľkého počtu enzymatických aktivít, jedinečnej štruktúry bunkovej steny a vhodných vlastností sú kmene uplatňované v biodegradácii a biotransformácii [2, 3].
Alkoholdehydrogenázy patria medzi enzýmy schopné katalyzovať interkonverziu medzi alkoholmi a príslušnými aldehydmi a ketónmi. Za posledné roky našli ADH široké uplatnenie ako biokatalyzátory pri príprave enantiomérnych zlúčenín [4]. NADH - dependentná ADH z Rhodococcus ruber exprimovaná v E. coli sa využíva na asymetrickú redukciu substrátov ako alkyl a aryl substituovaných ketónov. Stabilitu a aktivitu si zachováva i pri teplote 60°C [5].
Základným cieľom práce bolo získať čistý proteín, overiť jeho termostabilitu a zvýšiť solubilitu proteínu s využitím trehalózy. Vyzdvihujeme vlastnosti termostabilnej ADH izolovanej z Rhodococcus ruber. Vypurifikovali sme proteín pomocou afinitnej chromatografii. Na základe analýzy Western blot posudzujeme, že daný proteín je aj po pridaní trehalózy z väčšej časti stále nerozpustný. V budúcich experimentoch sa chceme venovať analýze aktivity daného proteínu za účelom jeho využitia v biotransformačných procesoch sekundárnych alkoholov, konkrétne 1-fenyletanolu.
Moderátor