Metóda Ramanovej spektroskopie je v oblasti biologických aplikácií veľmi populárna [1,2]. Umožňuje identifikovať látky podobne, ako je možné rozlíšiť ľudí podľa odtlačkov prstov. Pomocou tejto metódy s využitím špecifických receptorov boli už detekované niektoré molekuly, napríklad trombín [3], bisphenol A [4] a kokaín [5]. Špeciálne pripravené povrchy zosilňujú Ramanov signál. Táto metóda je známa pod skratkou SERS (Surface Enhanced Raman Spectroscopy – Povrchovo zosilnená Ramanova spektroskopia). Povrchy pre SERS sa vyznačujú hlavne drsnosťou. Pokrytie povrchu kovovou vrstvou umožňuje vznik povrchových plazmónov, ktoré dokážu zosilniť Ramanov signál až 1015 [6]. Vytvorenie SERS povrchov s vysokým zosilnením by dovolilo zaznamenať nízke koncentrácie proteínov, napríklad aj onkomarkerov, takých ako VEGF [7]. Cieľom tejto štúdie je vytvoriť povrch s dostatočným zosilnením, ktorý umožní detekciu nanomolárnych koncentrácii VEGF. SERS povrchy sa dajú vytvoriť rôznymi spôsobmi, s použitím nanočastíc napríklad polystyrénových nanosfér. Na vytvorenie SERS povrchov sme použili 3 druhy polystyrénových nanosfér s priemerom: 412 nm, 600 nm a 722 nm. Nanosféry s priemerom 600 nm boli funkcionalizované karboxylovými skupinami kvôli možnosti kovalentného naviazania na zlato. Testovali sme depozíciu nanosfér na povrch Si a Au pomocou metódy Langmuira-Blodgettovej a s využitím Petriho misiek, kde sa pomocou skla (ožiareného UV svetlom) pod uhlom nanášali nanosféry. Najlepšiu hexagonálnu štruktúru potrebnú pre správnu tvorbu plazmónov, po LB depozícii, vytvárali nanosféry s veľkosťou 722 nm. Na deponované nanosféry bola nanesená vrstva striebra hrúbky 50- 200 nm. Takto vytvorené povrchy sme inkubovali s rozličnými signálnymi molekulami ako AMP, cystamín, benzentiol a získali sme zosilnené Ramanovo spektrum. Skúmali sme aj časovú stabilitu substrátov, vzhľadom na to, že striebro rýchlo oxiduje.
Moderátor
iwa
Pasívny
ďakujeme za otázku. Predchádzajúcu odpoveď, ako Guest, pridal spoluautor príspevku Michal Pelach. Áno, použitie striebra by mohlo byť vysvetlením získaného vyššieho signálu ...Zobraziť celý komentár
Moderátor
Pasívny
ďakujeme za otázku. Stabilitou experimentálne vyrobených substrátov sme sa zaoberali. Intenzita získaného signálu klesla po 2 dňoch na 20 % pôvodnej hodnoty. Ďalším skúmaním...Zobraziť celý komentár