Úvod: Napriek výrazným pokrokom v terapii nádorových ochorení v posledných desaťročiach a množstvu novo vyvinutých chemoterapeutík ostáva úspešnosť liečby týchto ochorení často neuspokojivá. Je preto dôležité hľadať nové spôsoby terapie a skúmať látky s možným využitím v terapii onkologických ochorení. Jednou z možností kde tieto látky hľadať sú rastliny používané vo východnej medicíne a tradičnom liečiteľstve. Viacero rôznych látok s antiproliferatívnym účinkom na rakovinové bunky už bolo objavených práve v rastlinách používaných v alternatívnej medicíne a fytoterapii.[1, 2, 3, 4] V našom experimente sme sa zamerali na protirakovinový efekt výluhu listov Annona muricata, na sledovanie jeho vplyvu na proliferáciu buniek rakovinovej línie HT-29 (adenokarcinóm hrubého čreva) a indukciu apoptózy v tejto bunkovej línii.
Materiál a metódy: Usušené listy Annona muricata sme rozdrvili a lúhovali v DMEM pri teplote 80˚C počas 20 minút. Zriedením s DMEM sme z výluhu vytvorili 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,125% a 1,5625% roztoky. Roztoky sme nechali pôsobiť počas 72 hodín na bunkovú líniu HT-29. Pomocou testov cytotoxicity MTT a WST-1 (kolorimetrické testy založené na princípe rozloženia pridaného farbiva mitochondriálnymi enzýmami živých buniek) a testu apoptózy Muse™ Annexin V and Dead Cell Assay (fluorescenčná detekcia fosfatidylserínu na povrchu apoptotických buniek v prietokovom cytometri) sme zmerali hodnoty proliferácie a apoptózy buniek.
Výsledky: Z našich meraní vyplynulo, že roztok vytvorený vyluhovaním listov rastliny Annona muricata v DMEM (Dulbecco´s Modified Eagle´s Medium, médium štandardne používané na kutiváciu bunkovej línie HT-29) pri 80˚C počas 20 minút mal značný vplyv na proliferáciu a indukciu apoptózy v bunkovej línii HT-29. Čím menšie riedenie výluhu bolo použité, tým väčší vplyv na proliferáciu buniek sme pozorovali. Z výsledkov usudzujeme, že látky prítomné v listoch tejto rastliny indukujú apoptózu a znižujú proliferáciu v použitej bunkovej línii.
Záver: Z výsledkov usudzujeme, že látky prítomné v listoch tejto rastliny indukujú apoptózu a znižujú proliferáciu v použitej bunkovej línii. Do budúcnosti plánujeme zopakovať experiment s použitím metanolového extraktu. Tiež plánujeme uskutočniť chemickú analýzu použitého extraktu. Listy tejto rastliny majú podľa našich meraní antiproliferatívne účinky na bunky adenokarcinómu hrubého čreva a mohli by byť použité pri vývoji nových chemoterapeutík.
Pasívny