jazyk / language:
INTERAKTÍVNA KONFERENCIA
MLADÝCH VEDCOV
Späť do sekcie

Identifikácia sekalínov raže siatej pomocou A-PAGE

Diskusná interakcia
Celkové prevedenie (dizajn)
Vedecká práca
Zobraziť všetky hodnotenia

Prejsť do diskusie

Identifikácia sekalínov raže siatej pomocou A-PAGE

Lenka Petrovičová 1 Zdenka Gálová 1,2

1Slovenská poľnohospodárska univerzita v Nitre, Fakulta biotechnológie a potravinárstva, Katedra biochémie a biotechnológie, Trieda Andreja Hlinku 2, 949 76 Nitra
22Chemický Ústav SAV, Centrum excelentnosti pre bielo-zelenú biotechnológiu, Trieda A. Hlinku 2, SK-949 76 Nitra
petrovicovalenka22@gmail.com

Identifikácia a charakteristika genotypov obilnín na základe polymorfizmu bielkovín je dôležitá nielen z hľadiska šľachtiteľského, ale aj z pohľadu ich využitia pre potravinárske účely [1]. Cieľom našej práce bola separácia zásobných bielkovín zrna raže (ω-sekalíny, γ40k-sekalíny) na základe ich rozdielnej pohyblivosti v kyslej polyakrylamidovej elektroforéze (A-PAGE) s pH 3,2. Analyzované bolo zrno 10 genotypov raže siatej (Secale cereale L.) československého pôvodu, ktoré boli získané z Génovej banky semenných druhov VÚRV v Piešťanoch. Zásobné bielkoviny boli extrahované z individuálnych zŕn raže a separované štandardnou referenčnou metódou polyakrylamidovej gélovej elektroforézy podľa metodiky ISTA v kyslom prostredí A-PAGE [2]. Gély boli farbené v roztoku pripravenom z 10 % kyseliny trichlóroctovej, 0,5 % Coomassie Brilliant Blue R250 a odfarbované v destilovanej vode. Zásobné bielkoviny analyzovaného súboru raže boli elektroforeticky separované do dvoch rôznych frakcií podľa ich rozdielnej pohyblivosti v A-PAGE na ω-sekalíny s vysokou molekulovou hmotnosťou a γ40k-sekalíny s nízkou molekulovou hmotnosťou. Aplikáciou jednorozmernej elektroforézy boli sekalíny z jedného zrna raže separované na 7-15 subfrakcií. Z elektroforeogramov vyplýva, že zastúpenie ω-sekalínov, bolo v priemere 86,97 %, pričom ich variabilita sa pohybovala v rozmedzí od 74,43 % (odroda Nalžovské) do 91,71 % (odroda Valtické). Na síru chudobné ω-sekalíny sú charakteristické vysokým zastúpením glutamínu/glutamátu, prolínu a fenylalanínu. Zaujímavosťou je, že v  ω-sekalíny sa nenachádzajú sírne aminokyseliny cysteín a metionín. V zrne sa nachádzajú ako monomérne polypeptidy a sú homologické s ω-gliadínmi pšenice a C hordeínmi jačmeňa [3]. V strednej časti polyakrylamidového gélu boli separované γ40k-sekalíny, ktoré tvorili 13,03 % podiel. Najvyššie percentuálne zastúpenie γ40k-sekalínov sme zistili v odrode Nalžovské (21,56 %) a najnižší podiel vykazovala odroda Židlochovický Panis (21,56 %). Na síru bohaté γ40k-sekalíny sú homologické s γ-gliadínmi pšenice a B hordeínmi jačmeňa, pričom sa vyznačujú vysokým obsahom glutamínu a prolínu [3]. V analyzovanom súbore genotypov raže siatej bol detegovaný 1B3 blok, ktorý slúži ako marker nevhodnej technologickej kvality, ale na druhej strane vystupuje ako marker odolnosti k hrdzi trávovej Sr31.

Poďakovanie: Táto publikácia vznikla vďaka podpore v rámci operačného programu Výskum a vývoj pre projekt: Centrum excelentnosti pre bielo-zelenú biotechnológiu, ITMS 26220120054, spolufinancovaný zo zdrojov Európskeho fondu regionálneho rozvoja (50 %) a KEGA projektu č. 034SPU-4/2012 (25 %) a VEGA project No.1/0513/13 (20 %).
[1] Bradová, J. – Sýkorová, S. Optimalizace metod elektroforezy proteinů pro identifikaci odrůd jačmene, Výzkumný ústav rostlinné výroby Praha- Ruzyně, 2006.
[2] Draper, S. R. . Seed Sci. Technol., 1987, p. 431-434.
[3] Simpson, B. K. Food Biochemistry and Food Processing, pg. 660. New York: Wiley-Blackwell,  2012. ISBN 978-08138-0874-1.
Zdá sa, že Váš internetový prehliadač nepodporuje prehliadanie PDF dokumentov.
Pre zobrazenie súboru je potrebné maš nainštalovaný Adobe Reader.

Diskusia

Diskusia je zatiaľ prázdna, buďte prvý komentujúci
Naši partneri
Generálny partner

Partneri
Špeciálne poďakovanie
Mediálni partneri
Inzercia zadarmo
Usporiadateľ